Les tubes CTAD sont à privilégier pour l’hématologie féline

Les analyses de biologie médicale sont parfois compliquées chez le chat en raison de la difficulté technique du prélèvement, qui occasionne souvent des altérations du spécimen. En hématologie, les microcaillots sont en général détectables visuellement dans les tubes de sang prélevés sur EDTA, mais il n’en est pas de même des agrégats plaquettaires dont cet anticoagulant favorise la formation in vitro. Les conséquences de ces agrégats sont variables en fonction de leur taille et de l’automate d’hématologie utilisé. Les agrégats plaquettaires de grande taille – c’est-à-dire de taille supérieure à une cellule sanguine – ne sont pas détectés, quel que soit l’analyseur d’hématologie. Pour les agrégats de petite taille, les conséquences dépendent de l’automate employé. Avec un automate à variation d’impédance, utilisant le principe Coulter, les petits agrégats peuvent être reconnus comme une cellule plus volumineuse, telle qu’un leucocyte. Cela entraîne une tendance plus ou moins marquée à surestimer en nombre la population leucocytaire et à sous-estimer la numération plaquettaire. Mais, dans tous les cas, indépendamment de la taille des agrégats ou de la technique utilisée, les agrégats induisent une sous-estimation de la numération plaquettaire, avec des pseudo-thrombopénies relativement fréquentes. Cette problématique a fait l’objet d’une thèse de doctorat d’université, soutenue récemment à Toulouse par Fanny Granat¹, à la suite de travaux dirigés par les professeurs Nathalie Bourgès-Abella et Catherine Trumel dans l’équipe de biologie médicale-histologie Crefre², université de Toulouse, Inserm-UPS-ENVT³.

CTAD et numération plaquettaire

Le premier résultat, essentiel, est que la collecte de sang sur des tubes contenant du CTAD (citrate, théophylline, adénosine, dipyridamole) réduit considérablement, voire annule, l’agrégation plaquettaire fréquemment observée dans les tubes EDTA. Cela a été confirmé par agrégométrie, par comptage des agrégats sur des frottis, ainsi que par numération des plaquettes par trois techniques différentes. Ainsi, dans une comparaison où les deux tubes ont été utilisés chez les mêmes chats, une forte agrégation plaquettaire susceptible d’altérer notablement les résultats a été observée dans 41 tubes EDTA sur 81 et seulement dans un tube CTAD. Il en résulte que les numérations plaquettaires sont supérieures et plus exactes sur CTAD, quelle que soit la technique employée, impédance ou cytométrie de flux. Cette dernière offre, en outre, l’avantage de mieux tenir compte des macroplaquettes, fréquentes chez le chat, comptées en fonction de leur taille comme hématies ou leucocytes par un appareil à variation d’impédance et comme plaquettes volumineuses par un cytomètre de flux.

CTAD et autres analyses biologiques

Les autres analyses hématologiques donnent pratiquement les mêmes résultats sur tubes CTAD que sur tubes EDTA classiques, de même que les bilans d’hémostase secondaire réalisés sur le plasma. En biochimie, les résultats sont voisins de ceux des plasmas héparinés pour le dosage des triglycérides, du cholestérol, du glucose, de l’urée, de la créatinine, des phosphates, des protéines totales et de l’alanine aminotransférase (Alat), éventuellement avec un transfert d’intervalle de référence facile à effectuer. En revanche, les dosages des ions ne sont pas possibles. Le caractère d’anticoagulant presque universel du CTAD peut être un avantage majeur en limitant le nombre de tubes et le volume collectés. Ces études ont également permis de montrer que la stabilité des analytes hématologiques est meilleure dans les tubes CTAD que dans les tubes EDTA, jusqu’à 48 heures. L’ensemble des résultats de cette thèse montre que les tubes CTAD doivent désormais être privilégiés pour l’hématologie féline.
•

¹ Granat F. “Agrégation plaquettaire in vitro : effets anticoagulants du CTAD et utilisation à des fins diagnostiques dans les espèces sensibles”. Thèse de doctorat de l’université Toulouse III-Paul-Sabatier, 2016.

² Centre régional d’exploration fonctionnelle et de ressources expérimentales.

³ Institut national de la santé et de la recherche médicale-université Paul-Sabatier-École nationale vétérinaire de Toulouse.

⁴ Professeur dans le service de biologie médicale animale et comparée à l’école de Toulouse.

Retrouvez les références bibliographiques de cet article sur bit.ly/29iRs2l.